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【課程大綱】

什么是微生物檢驗員？

微生物檢驗員怎么獲��？企業(yè)怎么獲取微生物檢驗員證書？

誤差表示方法 準確度： 定義：是指試驗測得值與真實值之間的相符合的程度。準確度的高低常以誤差的大小來衡量。 誤差有兩種表示方法：絕對誤差、相對誤差 絕對誤差（E）=測得值(X)－真實值(T) 相對誤差(E%)=（測得值－真實值）/真實值×100％ 誤差小，表示測得值和真實值接近。測得準確度高。 相對誤差是誤差在真實值中所占百分數(shù)。

有效數(shù)字 使用有效數(shù)字時，應注意以下幾點： 記錄測量所得數(shù)據(jù)時，只允許保留一位可疑數(shù)字。（當用25ml無分度吸量管移取溶液時，應記錄為25.00ml。） 有效數(shù)字的位數(shù)反映了測量的相對誤差（如稱量某試劑的質量是0.5180g，表示該試劑質量是0.5180±0.0001，其相對誤差為0.02％，如果少取一位有效數(shù)字，表示該試劑的質量是0.518±0.001，其相對誤差為0.2％。） 有效數(shù)字的位數(shù)與量的使用單位無關。（如稱的某物的質量是12g，二位有效數(shù)字，若以mg為單位時，應記為1.2×104mg，而不應記為12000mg。） 數(shù)字前的零不是有效數(shù)字（0.025），起定位作用；數(shù)字后的零都是有效數(shù)字（120、0.5000）。

有效數(shù)字修約：四舍六入五保雙 若被舍棄的第一位大于5，則其前一位數(shù)字加1（如28.2645，取三位有效數(shù)字，位28.3）；若被舍棄的第一位小于5，則舍棄。 若被舍棄的第一位數(shù)等于5，而其后數(shù)字全部是0，則視被保留的末位數(shù)字為奇數(shù)還是偶數(shù)，末位是奇數(shù)加1，末位為偶數(shù)舍棄。（如28.250，28.350，28.050取3位有效數(shù)字：28.2，28.4，28.0） 若被舍棄的第一位數(shù)字是5，而其后的數(shù)字不全是0，無論前面是奇還是偶，皆進1（如28.2501，取3位有效數(shù)字，28.3）。 若被舍棄的數(shù)字包括幾位數(shù)字時，不得對該數(shù)進行連續(xù)修約。

一、微生物檢驗員證書頒發(fā)：

CCAA。

二、微生物檢驗員證書培訓費用：

1480元，費用包含：培訓費、資料費、證書費、快遞費、發(fā)票。

化驗室常用檢測設備 ：紫外分光光度計

使用說明
打開電源開關，預熱半小時
 調節(jié)波長
放入空白樣品
按一下"MODE"鍵，使"%T"的指示燈亮，在比色室的蓋子打開的狀態(tài)下按一下"0%T"鍵，使顯示窗中的數(shù)字為0.000。關閉比色室的蓋子，按一下"100%T ABSO" 鍵，使顯示窗中的數(shù)字為100.0。這樣，儀器就調整好了，請注意，每測一次樣品前都要重新調整"0％"和 "100％"。再按一下"MODE"鍵，使"ABS" 指示燈亮，按一下"100%T ABSO" 鍵，使顯示窗中的數(shù)字為0.000。 
空白取出，放入樣品。此時，顯示窗中的數(shù)字即為樣品的吸光度。 
比色皿：手只能拿比色皿的粗糙面，不能接觸光滑面。比色皿的內部的清洗只能用蒸餾水潤洗（用洗瓶），不可用衛(wèi)生紙或其它物品捅進去擦洗，比色皿的2個光滑面一定要保持清潔，如發(fā)現(xiàn)有指紋或殘液，須用衛(wèi)生紙輕輕擦拭干凈。 
色皿是成套發(fā)放的，嚴禁混用。
使用完畢后用蒸餾水或純凈水沖洗干凈比色皿。

三、微生物檢驗員證書培訓內容

1.檢驗的化學基礎;

2.實驗室安全知識;

3.實驗室常用儀器講解;

4.檢驗技術及微生物檢驗技術，大腸桿菌，菌落總數(shù)，無菌、藥典、霉菌、酵母菌、金色葡萄球菌，志賀氏菌、溶血性鏈球菌、綠膿桿菌等菌種的實操視頻。

四、微生物檢驗員證書培訓相關

檢驗方法：一般只檢驗水中的菌落總數(shù)和大腸桿菌近似數(shù)（MPN），以此來判斷水的衛(wèi)生質量。 水中菌落總數(shù)的測定：GB/T 4789.2 水中大腸菌群的測定: GB/T 4789.2 發(fā)酵法：適用廣，但操作繁瑣，時間長。 濾膜法：僅適用于自來水和深井水，操作簡單快速，但不適用雜質太多和易阻塞濾孔的水樣。

空氣樣品的采集與處理：意義：空氣作為人類、畜禽傳播疾病的主要媒介之一，測定其微生物的種類與數(shù)量，對保證食品安全以及預防某些傳染病尤為重要。

空氣中微生物指標。 常存在于口腔和鼻腔中的鏈球菌，通常以每立方米中菌落總數(shù)或鏈球菌數(shù)的多少來表示（表1-2，室內空氣的衛(wèi)生標準）。 大腸桿菌與魏氏梭菌——空氣被糞便的塵土污染； 變形桿菌——空氣被各種腐敗物質的分解物污染； 需氧芽孢桿菌——空氣被塵土污染。

空氣樣品的采集與處理 采樣方法有直接沉降法、過濾法和氣流撞擊法。 氣流撞擊法最完善，其能較為準確的表示空氣中細菌的真正含量。 氣流撞擊法需特殊儀器有布爾吉利翁失儀器和克羅托夫氏儀等。

五、微生物檢驗員證書相關

三級法有n、c、m及M值。M即附加條件后判定合格的菌數(shù)限量。 設有微生物標準m及M值兩個限量，超過m值的檢樣，即算為不合格品。其中以m值到M值的范圍內的檢樣數(shù)，作為c值，如果在此范圍內，即為附加條件合格，超過M值者，則為不合格。 例如：冷凍生蝦的細菌數(shù)標準 n=5，c=3，m=102CFU/g，M=103CFU/g，其意義是從一批產品中，取5個檢樣，經(jīng)檢樣結果，允許≤3個檢樣的菌數(shù)是在m～M值之間，如果有3個以上檢樣的菌數(shù)是在m～M值之間或一個檢樣菌數(shù)超過M值者，則判定該批產品為不合格品。 對健康危害低的情況下建議使用三級抽樣方案

隨機抽樣，就是保證在抽取樣本過程中，排除一切主觀意向，使批中的每個單位產品都有同等被抽區(qū)的機會的一種抽樣方法。 在現(xiàn)場抽樣時，可利用隨機抽樣表進行隨機抽樣。隨機抽樣表系用計算機隨機編制而成，包括一萬個數(shù)字。 其使用方法如下：a先將一批產品的各單位產品（如箱、包、盒等）按順序編號。如將一批600包的產品編為1、2……600。b.隨意在表上點出一個數(shù)。c.根據(jù)單位產品編號的位數(shù)進行抽樣。重復抽樣，直到完成應抽樣品件數(shù)為止。

1、瓶裝液體樣品的處理 :用點燃的酒精棉球灼燒瓶口滅菌，接著用石炭酸或來蘇爾消毒后的紗布蓋好，再用滅菌開瓶器將蓋啟開； 含有二氧化碳的樣品可倒入500mL磨口瓶內，口勿蓋緊，覆蓋一滅菌紗布，輕輕搖蕩，待氣體全部逸出后，取樣25mL檢驗。

2、盒裝或軟塑料包裝樣品的處理 :將其開口處用75%酒精棉擦拭消毒，用滅菌剪子剪開包裝，覆蓋上滅菌紗布或浸有消毒液的紗布在剪開部分，直接吸取樣品25mL ，或傾入另一滅菌容器中再取樣25mL檢驗。

固體樣品的處理：1、搗碎均質法 ;將中樣(≥100g)剪碎或攪拌混勻，從中取25g放入帶225mL稀釋液的無菌均質杯中，8000~10000r/min均質1~2min即可。

剪碎振搖法:將中樣(≥100g)剪碎或攪拌混勻，從中取25g檢樣進一步剪碎，放入帶225mL稀釋液和直徑5mm左右玻璃珠的稀釋瓶中，蓋緊瓶蓋，用力快速振搖50次，振幅要大于40cm。

研磨法 :將中樣(≥100g)剪碎或攪拌混勻，從中取25g檢樣放入無菌乳缽中充分研磨后，再放入帶有225mL無菌稀釋液的稀釋瓶中，蓋緊蓋后充分搖勻。

整粒振搖法 :直接稱取25g整粒樣品置于帶有225mL稀釋液和直徑5mm左右玻璃珠的稀釋瓶中，蓋緊瓶蓋，用力快速振搖50次，振幅要大于40cm。

操作環(huán)境 潔凈度：微生物限度檢查應在環(huán)境潔凈度10000級下的局部潔凈度100級的單向流空氣區(qū)域內進行。檢驗全過程必須嚴格遵守無菌操作，防止再污染。 潔凈度定期檢測:單向流空氣區(qū)域、工作臺面及環(huán)境應定期按《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌、和沉降菌的測試方法》的現(xiàn)行國家標準進行潔凈度驗證。

●細菌培養(yǎng)溫度:30～35℃。 ●霉菌、酵母菌培養(yǎng)溫度:23（25）～28℃。 控制菌培養(yǎng)溫度:35～37℃ ●結果報告：以1g、1ml、10g、10ml 或 10cm2 為單位報告。

抽樣量 ：隨機抽取不少于檢驗量（兩個以上最小包裝單位）的3倍。 ● 檢驗量：一次試驗所用的供試品的量。一般為10g或10ml；中藥膜劑50 cm2，化學藥膜劑為100cm2；貴重或微量包裝的藥品酌減（不得少于3g）。 ●檢查沙門菌的供試品其檢驗量改為10g或10ml。從2個包裝以上取樣。

表面活性劑、中和劑或滅活劑：應證明其有效性及對微生物的生長和存活無影響。 ● 供試液從制備至加入檢驗用培養(yǎng)基，不得超過1小時。 ● 供試液制備若需用水浴加溫時，溫度不應超過45℃。 ● 供試液的體積：100ml。

供試品分類 液體供試品 固體、半固體或黏稠液性供試品 需用特殊供試液制備方法的供試品 非水溶性供試品 膜劑供試品 腸溶及結腸溶制劑供試品 氣霧劑、噴霧劑供試品 具抑菌活性的供試品

微生物檢驗員證書



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【講師介紹】

微生物檢驗員
食品化學微生物實驗室
醫(yī)療器械行業(yè)申請GMP
化妝品行業(yè)

【培訓對象】

1.企業(yè)主管食品質量、安全標準及監(jiān)督管理工作崗位的人員、食品生產企業(yè)、經(jīng)銷單位、質量監(jiān)督部門、衛(wèi)生檢驗部門及有關科研、管理部門的管理人員、技術人員和檢驗人員。

更新時間：2024/10/27 9:33:09