【課程大綱】什么是微生物檢驗員？
微生物檢驗員怎么獲��？企業怎么獲取微生物檢驗員證書？
冷凍樣品的處理 ：冷凍樣品，先將中樣在0~4 ℃下解凍，時間不能超過18h，或在 45 ℃下解凍，時間不能超過15min。再取檢樣25g做稀釋處理。樣品的稀釋：液體樣品：倍比稀釋，20min內完成稀釋。
小顆粒固體樣品：均質后倍比稀釋，以30cm的幅度搖動25次，20min內完成稀釋。
粉末或軟塊樣品：拍擊式均質30s，脂肪濃度高的樣品90s，過程不會引起溫度升高，20min內完成稀釋。
表面樣品：倍比稀釋，20min內完成稀釋。
一、微生物檢驗員證書頒發：
CCAA。
二、微生物檢驗員證書培訓費用：
1480元，費用包含：培訓費、資料費、證書費、快遞費、發票。
奶油 無菌操作打開包裝，取適量檢樣于滅菌三角燒瓶內，450C水浴或溫箱中加溫溶解，用滅菌吸管取25mL奶油放入含225ml滅菌生理鹽水或滅菌奶油稀釋液的燒瓶（瓶裝稀釋液應預置于450C水浴中保溫，10倍遞增稀釋時所用稀釋液亦同），振搖均勻，從檢樣融化到接種完畢時間不應超過30min。 注：奶油稀釋液：格林氏液（配法：氯化鈉9g、氯化鉀0.12g、氯化鈣0.24g、碳酸氫鈉0.2g、蒸餾水1000ml）250mL、蒸餾水750ml、瓊脂1g、加熱溶解，分裝每瓶225ml，1210C滅菌15min。
奶粉 罐裝奶粉的開罐取樣法同煉乳，袋裝奶粉應用蘸有75%酒精的棉球涂擦消毒袋口，以無菌操作開封取樣，稱取檢樣25g，放入裝有適量玻璃珠的滅菌三角燒瓶內，將225ml溫熱的滅菌生理鹽水徐徐加入（先用少量生理鹽水將奶粉調成糊狀，再全部加入，以免奶粉結塊），振搖使充分溶解和混勻。
奶酪 先用滅菌刀削去部分表面封蠟，用點燃的酒精棉球消毒表面，然后用滅菌刀切開奶酪，以無菌操作切取表層和深層檢樣各少許，置于滅菌乳缽內切碎，加入少量生理鹽水研成糊狀
三、微生物檢驗員證書培訓內容
1.檢驗的化學基礎;
2.實驗室安全知識;
3.實驗室常用儀器講解;
4.檢驗技術及微生物檢驗技術，大腸桿菌，菌落總數，無菌、藥典、霉菌、酵母菌、金色葡萄球菌，志賀氏菌、溶血性鏈球菌、綠膿桿菌等菌種的實操視頻。
四、微生物檢驗員證書培訓相關
方法：濾膜、材質、過濾等相關要求。 操作注意：避免微生物受損，降低檢出。 取相當于1g或1ml供試品的供試液lml直接過濾，或加至 100ml稀釋劑中，混勻，過濾。用pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩 沖液或其它適宜的沖洗液沖洗濾膜，沖洗方法和沖洗量同"方 法的驗證"。沖洗后取出濾膜，菌面朝上貼于營養瓊脂培養基 或玫瑰紅鈉瓊脂培養基或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養基平板 上培養。每種培養基至少制備一張濾膜。
菌數報告規則：以相當于1g或1ml供試品的菌落數報告；若濾膜上無菌落生長，以＜1報告菌數（每張濾膜過濾1g或1ml供試品），或乘以稀釋倍數的值報告菌數。
五、微生物檢驗員證書相關
修訂的檢查法 大腸埃希菌檢查法、銅綠假單胞菌檢查法、 沙門菌檢查法、金黃色葡萄球菌檢查法。 ●新增的檢查法 大腸菌群檢查法（近期、遠期污染）、梭菌檢查法檢查法。 供試品的控制菌檢查應按已驗證的方法進行，增菌培養基的實際用量同控制菌檢查方法的驗證。驗證的目的: 確認所采用的方法適合于供試品的微生物限度檢查。 ● 驗證的意義：保證檢驗結果的準確、可靠及檢驗方法的完整性。
驗證的目的: 確認所采用的方法適合于供試品的微生物限度檢查。 ● 驗證的意義：保證檢驗結果的準確、可靠及檢驗方法的完整性。
驗證的必要性 理論上要求、試驗結果要求 ● 驗證的內容 準確性(回收率)、專屬性
前驗證: 建立藥品的微生物限度檢查法時. ▲ 再驗證: 修訂的檢驗方法;供試品的組分或原檢驗條件發生改變可能影響檢驗結果時 ;定期的方法驗證.
驗證用菌株：大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠 菌、黑曲霉、枯草桿菌。 ●菌株選擇的原則:代表性,普遍性,低或非致病性,標準 菌株(或該藥品中常見的污染菌)。 ●菌種的要求：不得超過5代。采用適宜的方法保存。 ●菌液制備:50～100cfu/ml。
b、禽類（包括家禽和野禽） 鮮、凍家禽采取整只，放無菌容器內；帶毛野禽可放清潔容器內，立即送檢。 c、各類熟肉制品 包括醬鹵肉、肴肉、方圓腿、熟灌腸、熏烤肉、肉松、肉脯、肉干等，一般采取200g，熟禽采取整只，均放無菌容器內，立即送檢。 d、臘腸、香肚等生灌腸 采取整根、整只，小型的可采數根、數只，其總量不少于250g。
檢樣的處理 a、生肉及臟器檢樣的處理 先將檢樣進行表面消毒（在沸水內燙3s~5s，或灼燒消毒），再用無菌剪剪取檢樣深層肌肉25g，放入無菌乳缽內用滅菌剪剪碎后，加滅菌海砂或玻璃砂或玻璃砂研磨，磨碎后加入滅菌水225mL，混勻后即為1:10稀釋液。 b、鮮、凍家禽檢樣的處理 先將檢樣進行表面消毒，用滅菌剪或刀去皮后，剪取肌肉25g（一般可從胸部或腿部剪取），以下處理同生肉。帶毛野禽去毛后，同家禽檢樣處理。
棉拭采樣法和檢樣處理 一般用板孔5cm2的金屬制規板，壓在受檢物上，將滅菌棉拭稍沾濕，在板孔5cm2的范圍內揩抹多次，然后將板孔規板移壓另一點，用另一棉拭揩抹，如此共移壓揩抹10次，總面積50cm2。每支棉拭在揩抹完畢后立即剪斷或燒斷后投入盛50ml滅菌水的三角瓶或大試管中，立即送檢。檢驗時充分振搖瓶、管中液體，作為原液，再作10倍遞增稀釋。 檢驗致病菌，不必用規板，在可疑部位用棉拭揩抹即可。 4、檢驗方法 見菌落總數、大腸菌群測定及有關致病菌和霉菌的檢驗。
誤差是客觀存在的 誤差分類 ：根據誤差產生的原因和性質將誤差分為系統誤差和偶然誤差。 系統誤差：又稱可測誤差，由化驗操作過程中某些固定原因造成的。 具有單向性，即正負、大小都有一定的規律性，當重復進行實驗分析時會重復出現。 若找出原因，即可設法減少到可忽略的程度。
系統誤差 產生原因 方法：指化驗方法本身造成的誤差。如沉淀的溶解、反應不完全、指示劑終點與化學計量點不符合等。 儀器：由于使用的儀器本身不夠精密所造成的。 試劑：由于試劑不純或蒸餾水不純，含有被測物或干擾物而引起的誤差。 操作：由于化驗人員對分析操作不熟練，對終點顏色敏感性不同、對刻度讀數不正確等引起。 校正方法： 采用標準方法與標準樣品進行對照試驗； 校正儀器減小儀器誤差； 采用純度高的試劑校正試劑誤差； 提高人員業務水平，減少操作誤差。
偶然誤差：隨機的、不可避免的，呈正態分布又稱隨機誤差，是由某些難以控制、無法避免的偶然因素造成的，其大小與正負都是不固定的。如操作中溫度、濕度、灰塵等的影響都會引起分析數值的波動。 產生原因：操作中溫度、濕度、灰分等的影響都會引起分析數值的波動。 減少偶然誤差應重復多次平行實驗并取平均值。 過失誤差：操作人員的粗心大意或未按操作規程做，可避免。
微生物檢驗員證書
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【講師介紹】微生物檢驗員
食品化學微生物實驗室
醫療器械行業申請GMP
化妝品行業
【培訓對象】1.企業主管食品質量、安全標準及監督管理工作崗位的人員、食品生產企業、經銷單位、質量監督部門、衛生檢驗部門及有關科研、管理部門的管理人員、技術人員和檢驗人員。
更新時間：2024/10/22 8:33:10
