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【課程大綱】

什么是微生物檢驗員？

微生物檢驗員怎么獲��？企業(yè)怎么獲取微生物檢驗員證書？


操作環(huán)境 潔凈度：微生物限度檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級下的局部潔凈度100級的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進行。檢驗全過程必須嚴格遵守無菌操作，防止再污染。 潔凈度定期檢測:單向流空氣區(qū)域、工作臺面及環(huán)境應(yīng)定期按《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌、和沉降菌的測試方法》的現(xiàn)行國家標準進行潔凈度驗證。

●細菌培養(yǎng)溫度:30～35℃。 ●霉菌、酵母菌培養(yǎng)溫度:23（25）～28℃。 控制菌培養(yǎng)溫度:35～37℃ ●結(jié)果報告：以1g、1ml、10g、10ml 或 10cm2 為單位報告。

抽樣量 ：隨機抽取不少于檢驗量（兩個以上最小包裝單位）的3倍。 ● 檢驗量：一次試驗所用的供試品的量。一般為10g或10ml；中藥膜劑50 cm2，化學(xué)藥膜劑為100cm2；貴重或微量包裝的藥品酌減（不得少于3g）。 ●檢查沙門菌的供試品其檢驗量改為10g或10ml。從2個包裝以上取樣。

表面活性劑、中和劑或滅活劑：應(yīng)證明其有效性及對微生物的生長和存活無影響。 ● 供試液從制備至加入檢驗用培養(yǎng)基，不得超過1小時。 ● 供試液制備若需用水浴加溫時，溫度不應(yīng)超過45℃。 ● 供試液的體積：100ml。

供試品分類 液體供試品 固體、半固體或黏稠液性供試品 需用特殊供試液制備方法的供試品 非水溶性供試品 膜劑供試品 腸溶及結(jié)腸溶制劑供試品 氣霧劑、噴霧劑供試品 具抑菌活性的供試品


一、微生物檢驗員證書頒發(fā)：

CCAA。 

二、微生物檢驗員證書培訓(xùn)費用：

1480元，費用包含：培訓(xùn)費、資料費、證書費、快遞費、發(fā)票。 


1．取經(jīng)37℃培養(yǎng)18-24小時，金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草桿菌、銅綠假單胞菌 10104肉湯培養(yǎng)物、 生孢梭菌 64941硫乙醇酸鹽培養(yǎng)物1ml+9ml鹽水10倍稀釋至10-5 ~10-7為50~100個/ml，做活菌計數(shù)備用 2．取經(jīng)25℃ 培養(yǎng)18~24小時的白色念珠菌霉菌液體培養(yǎng)物1ml+9 ml鹽水10倍稀釋至10-5 ~10-6為50~100個/ml，做活菌計數(shù)備用 3．取經(jīng)25℃ 培養(yǎng)1周的黑曲霉菌斜面培養(yǎng)物，加3~5ml鹽水洗下霉菌孢子，吸取出菌液， 用標準比濁管比濁，與濁度相當后，取1 ml +9 ml鹽水=10-1，逐管10倍稀釋為10-4約50~100個/ ml，做活菌計數(shù)備用

結(jié)果判斷：供試品組的菌回收率、稀釋劑對照組的菌回收率。 試驗組的菌回收率=[（試驗組平均菌落數(shù)–供試品對照組平均菌落數(shù)）/菌液組平均菌落數(shù) ]×100% 稀釋劑對照組的菌回收率=[（稀釋劑對照組的平均菌落數(shù)/菌液組的平均菌落數(shù)）]×100% ●判斷標準: 菌回收率均不低70% 。

試驗菌株：按規(guī)定檢查的控制菌選擇相應(yīng)驗證的菌株。 ●陰性對照菌株:設(shè)立陰性對照菌是為了驗證該控制菌檢查方法的專屬性。金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、梭菌用大腸埃希菌；大腸埃希菌、沙門菌、大腸菌群用金黃色葡萄球菌。 ●菌種的要求：不得超過5代。采用適宜的方法保存。 ●菌液制備:10～100cfu/ml。


三、微生物檢驗員證書培訓(xùn)內(nèi)容

1.檢驗的化學(xué)基礎(chǔ);

2.實驗室安全知識;

3.實驗室常用儀器講解;

4.檢驗技術(shù)及微生物檢驗技術(shù)，大腸桿菌，菌落總數(shù)，無菌、藥典、霉菌、酵母菌、金色葡萄球菌，志賀氏菌、溶血性鏈球菌、綠膿桿菌等菌種的實操視頻。 

四、微生物檢驗員證書培訓(xùn)相關(guān)


樣品的送檢 ：采集好的樣品及時送到檢驗室。 一般不超過3h；路途要遙遠時，不需冷凍的樣品置于1-5 ℃環(huán)境中，切勿凍結(jié)；需保持冷凍狀態(tài)的樣品保存于泡沫塑料隔熱箱內(nèi)，防止反復(fù)冷凍和溶解

2. 樣品送檢時認真填寫申請單，供檢測人員參考。

3. 拿到送檢單后，檢驗人員應(yīng)立即登記，填寫序號，并按要求將樣品置于冰箱或冰盒中。

4. 微生物檢驗室必須備有專用冰箱存放樣品。

一般陽性樣品存放3d；進口陽性樣品存放6個月；陰性樣品及時處理。


五、微生物檢驗員證書相關(guān)


b、禽類（包括家禽和野禽） 鮮、凍家禽采取整只，放無菌容器內(nèi)；帶毛野禽可放清潔容器內(nèi)，立即送檢。 c、各類熟肉制品 包括醬鹵肉、肴肉、方圓腿、熟灌腸、熏烤肉、肉松、肉脯、肉干等，一般采取200g，熟禽采取整只，均放無菌容器內(nèi)，立即送檢。 d、臘腸、香肚等生灌腸 采取整根、整只，小型的可采數(shù)根、數(shù)只，其總量不少于250g。

檢樣的處理 a、生肉及臟器檢樣的處理 先將檢樣進行表面消毒（在沸水內(nèi)燙3s~5s，或灼燒消毒），再用無菌剪剪取檢樣深層肌肉25g，放入無菌乳缽內(nèi)用滅菌剪剪碎后，加滅菌海砂或玻璃砂或玻璃砂研磨，磨碎后加入滅菌水225mL，混勻后即為1:10稀釋液。 b、鮮、凍家禽檢樣的處理 先將檢樣進行表面消毒，用滅菌剪或刀去皮后，剪取肌肉25g（一般可從胸部或腿部剪�。�，以下處理同生肉。帶毛野禽去毛后，同家禽檢樣處理。

棉拭采樣法和檢樣處理 一般用板孔5cm2的金屬制規(guī)板，壓在受檢物上，將滅菌棉拭稍沾濕，在板孔5cm2的范圍內(nèi)揩抹多次，然后將板孔規(guī)板移壓另一點，用另一棉拭揩抹，如此共移壓揩抹10次，總面積50cm2。每支棉拭在揩抹完畢后立即剪斷或燒斷后投入盛50ml滅菌水的三角瓶或大試管中，立即送檢。檢驗時充分振搖瓶、管中液體，作為原液，再作10倍遞增稀釋。 檢驗致病菌，不必用規(guī)板，在可疑部位用棉拭揩抹即可。 4、檢驗方法 見菌落總數(shù)、大腸菌群測定及有關(guān)致病菌和霉菌的檢驗。



冷凍樣品的處理 ：冷凍樣品，先將中樣在0~4 ℃下解凍，時間不能超過18h，或在 45 ℃下解凍，時間不能超過15min。再取檢樣25g做稀釋處理。樣品的稀釋：液體樣品：倍比稀釋，20min內(nèi)完成稀釋。

小顆粒固體樣品：均質(zhì)后倍比稀釋，以30cm的幅度搖動25次，20min內(nèi)完成稀釋。
粉末或軟塊樣品：拍擊式均質(zhì)30s，脂肪濃度高的樣品90s，過程不會引起溫度升高，20min內(nèi)完成稀釋。
表面樣品：倍比稀釋，20min內(nèi)完成稀釋。




三級法有n、c、m及M值。M即附加條件后判定合格的菌數(shù)限量。 設(shè)有微生物標準m及M值兩個限量，超過m值的檢樣，即算為不合格品。其中以m值到M值的范圍內(nèi)的檢樣數(shù)，作為c值，如果在此范圍內(nèi)，即為附加條件合格，超過M值者，則為不合格。 例如：冷凍生蝦的細菌數(shù)標準 n=5，c=3，m=102CFU/g，M=103CFU/g，其意義是從一批產(chǎn)品中，取5個檢樣，經(jīng)檢樣結(jié)果，允許≤3個檢樣的菌數(shù)是在m～M值之間，如果有3個以上檢樣的菌數(shù)是在m～M值之間或一個檢樣菌數(shù)超過M值者，則判定該批產(chǎn)品為不合格品。 對健康危害低的情況下建議使用三級抽樣方案

隨機抽樣，就是保證在抽取樣本過程中，排除一切主觀意向，使批中的每個單位產(chǎn)品都有同等被抽區(qū)的機會的一種抽樣方法。 在現(xiàn)場抽樣時，可利用隨機抽樣表進行隨機抽樣。隨機抽樣表系用計算機隨機編制而成，包括一萬個數(shù)字。 其使用方法如下：a先將一批產(chǎn)品的各單位產(chǎn)品（如箱、包、盒等）按順序編號。如將一批600包的產(chǎn)品編為1、2……600。b.隨意在表上點出一個數(shù)。c.根據(jù)單位產(chǎn)品編號的位數(shù)進行抽樣。重復(fù)抽樣，直到完成應(yīng)抽樣品件數(shù)為止。


微生物檢驗員證書



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【講師介紹】

微生物檢驗員
食品化學(xué)微生物實驗室
醫(yī)療器械行業(yè)申請GMP
化妝品行業(yè)

【培訓(xùn)對象】

1.企業(yè)主管食品質(zhì)量、安全標準及監(jiān)督管理工作崗位的人員、食品生產(chǎn)企業(yè)、經(jīng)銷單位、質(zhì)量監(jiān)督部門、衛(wèi)生檢驗部門及有關(guān)科研、管理部門的管理人員、技術(shù)人員和檢驗人員。

更新時間：2024/10/5 18:44:47